俄科学家提出癌症诊断新方法 实用性尚待验证

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传统方法和现代方法

免疫组化被视为世界肿瘤学黄金标准。这种方法在生物材料中揭示出恶性肿瘤特有的特殊标记蛋白。从技术上讲该过程如下：将肿瘤组织样本浸入热石蜡中，然后冷却并切成薄片。切片用特殊化学成分染色，显微镜下染色切片上的映像可提供有关肿瘤类型及其恶性程度的可靠信息，能帮助医生选择正确治疗方案。RNA测序法的工作原理则不同。在生物材料细胞中分析RNA分子的序列和数量通过复杂算法完成，输出细胞中所有基因活性数据组，即转录本。

高效、经济

俄罗斯科学家提出将RNA测序法应用于浸入石蜡的肿瘤切片。文章说，对39个乳腺肿瘤样本和14个肺肿瘤样本的研究表明，RNA分析能可靠评估肿瘤标志物基因水平。研究项目负责人布兹京（Anton Buzdin）说：“我们率先证明了RNA测序法和免疫组化免结果彼此间完全相符。”他说，新方法比传统方法更经济。莫斯科物理技术学院引用布兹京的话宣布：“免疫组化研究需做更多实验并消耗更多材料。RNA测序法能立即定量表征所有蛋白质编码基因的工作，数量约2万个。”布兹京认为RNA测序法在医学诊断中前景广阔，可以作为传统免疫组化方法的替代和补充。

专家评价

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病理医生、癌症诊断专家马克西姆·乌恩采斯科（Maksim Untsesko）表示：“通过RNA测序法可以评估基因损伤的功能机制，而免疫组化则只能给出某一时刻细胞生命的静态图”。他指出，这个方法前景非常广阔，因为它可以动态显示细胞中的病理过程：如何激活或灭活某些基因，合成病理改变的蛋白质。

LabQuest实验室病理形态学、临床细胞学和分子遗传研究部负责人亚历山大·佐托夫（Alexandr Zotov）表示：“在新的方法中，研究的对象并非蛋白质本身，而是信使RNA中核苷酸的拷贝数和序列。这样就可以消除与免疫组化方法相关的限制，例如，由于研究设计和获取数据的模式不同，并非总是能够对通过各种研究得出的结果进行比较”。然而，据他介绍称，新的方法同时也存在一些新的限制：它无法对通过遗传编码获得其特性的蛋白质进行评估。

研究细节引起一些专家的不同评价。肿瘤科医生、开发根据肿瘤基因对癌症进行个性化治疗方法的ONCOGENOTEST公司总经理拉巴耶夫（Gennadiy Rabaev）认为，分析浸入石蜡的生物材料中的RNA很费力，值得注意。他说：“文章作者宣称的在对浸入石蜡的肿瘤RNA的分析中实现与免疫组化一样的精确度确实是项艰巨任务，因为RNA的结构并不稳定，在石蜡中可能会发生降解。”

俄罗斯最大肿瘤医院布洛欣国家肿瘤医学研究中心肿瘤科医生萨莫伊连科（Igor Samoylenko）认为文章的结论没有什么可令人激动的。他说：“合成RNA和合成蛋白质是实施遗传信息（基因表达）的两个连续步骤，可以预料到高水平RNA与高水平蛋白质相关。”此外，萨莫伊连科还认为RNA测序法尚没有令人信服的基础进行临床应用。他说：“临床应用需要通过特定样本证明新方法是否正确，文章中只是取数十个样本的平均值证明新方法的正确性。”

新方法到底有多新？

萨莫伊连科说，RNA分析和RNA测序法都不是实用肿瘤学的新方法。他说：“PubMed已记录过肿瘤学中RNA测序法这一课题的5997项科研工作。RNA测试已经过检验，一直应用于乳腺癌诊断及PD-L1（负责判断许多恶性肿瘤发病机理的蛋白质——编者注）活性的评估。”

拉巴耶夫认为，尽管已有实际应用RNA测序法的案例，但仍可以视其为相对较新的方法。他说：“不管是DNA还是RNA，下一代测序技术（NGS）都是相当新的技术。最早的下一代测序技术商业化应用2005年才出现，近十年全世界已开始广泛应用。”拉巴耶夫说，临床实践中尚无通过测序方法进行基于RNA分析的疫病普查和早期诊断的测试案例。他说：“莫斯科物理技术学院的科学家提出的方法无疑是具有创新性的。”

病理医生、癌症诊断专家马克西姆·乌恩采斯科表示：“RNA测序法是一组具有不同应用性、敏感性和特异性的方法”。他指出：“这一组方法被广泛应用于肿瘤学。然而，要在临床实践中应用，需要进行长期的临床试验，以证明其对患者的有效性和安全性”。

新技术是否适用于实际应用？

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拉巴耶夫认为，RNA测序法生物材料测试质量很大程度上取决于原材料，即浸入石蜡之前肿瘤细胞的质量及提取材料的时间。他说：“根据我的经验，下一代测序技术结果不准往往是由于材料质量差。严格遵守RNA分离和测序规程也很重要，需要从事下一代测序技术工作的生物学家的经验。”拉巴耶夫还认为，尽管存在各种局限，但这种方法前景广阔。他说：“目前我们看到从事肿瘤学领域下一代测序技术的实验室越来越多。我们认为未来五年内该技术一定会在肿瘤学实践中占据一席之地，而且会成为可广泛应用的技术。”

亚历山大·佐托夫表示：“目前市场上有相当多系列的可以更加便于应用该方法的新一代设备”。专家指出：“同时，要取得研究成功所需的材料的体积可以比组织学或免疫组化研究所需的材料小得多，从而确保能够进行微创诊断”。

与之相反，萨莫伊连科不认为RNA测序法在实践中会取得成功。他说：“由于存在各方面复杂性，RNA测序法并非适用于常规临床测试。查找是种好方法，常规测试则无论技术还是经济上都是大材小用。”

本文为《透视俄罗斯》专稿

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阿列克谢·莫斯克（Alexey Mosko）